ライゲーション反応にはTaKaRaのDNA Ligation Kit を用いている。反応条件については、添付の説明書に準拠するが、最も一般的な反応の手順を次に示す。

PCR産物のクローニングはTA cloningの項を参照のこと。

ヒント：インサートとベクターの比率はinsert: vector = 3-6: 1がよいと言われている。

１）減圧乾燥した目的DNAを4μlのTE溶液に溶解

２）氷冷しながら、0.5 μlのプラスミドベクター (1μg/μl)、4.5 μlのLigation Solution を順に加え、緩やかに混和

３）直ぐに16℃に移して30分～20時間インキュベート（経験的には長くても大差ない）

４）これを直接形質転換その他の目的で使用する